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植物類黃酮含量檢測試劑盒代測服務說明

植物類黃酮含量檢測試劑盒

Plant Flavonoids Content Assay Kit


產品描述

植物類黃酮是廣泛存在于蔬菜、水果、牧草和藥用植物中的次生代謝物,主要以游離態或與糖結 合為苷的形式存在,屬于生物活性強、毒副作用小、藥用價值高的天然植物成分,在醫藥領域具有廣 闊的應用前景和潛在的開發利用價值。 類黃酮與鋁離子能夠在堿性亞硝酸鹽溶液中形成紅色絡合物,產物在 510 nm 處具有特征吸收峰, 通過吸光值的變化即可定量檢測植物類黃酮的含量。

 

QQ截圖20210610123053.png

產品使用說明

測定過程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、研缽/勻漿器、可調式移 液器、臺式離心機、恒溫水浴/培養箱和蒸餾水。

1.植物類黃酮的提取(可根據預實驗結果適當調整樣本量及比例) 取適量植物樣本烘干至恒重,粉碎后過 30-50 目篩;稱取 0.1 g 粉碎樣本,加入 1 mL 提取液,超 聲提取(60℃,功率 300 W,超聲 5 s,間歇 8 s,總時間 30 min);12000 rpm 常溫離心 10 min,取全 部上清即為待測樣本。

2.測定步驟 

①分光光度計預熱 30 min 以上,調節波長至 510 nm,蒸餾水調零。

②在離心管中依次加入下列試劑:

圖片1.png


吸光值測定(顯色后 1 h 內完成測定):將反應液置于 1 mL 玻璃比色皿中,測定 510 nm 處吸光 值,記為 A 測定、A 對照、A 標準和 A 空白;計算?A 測定=A 測定-A 對照,?A 標準=A 標準-A 空 白。注:每個測定管均需設一個對照管,空白管只需測定 1-2 次。

標準曲線的建立:以 0.4、0.2、0.1、0.05、0.025 mg/mL 為橫坐標(x),以其對應的?A 標準為縱 坐標(y),繪制標準曲線,得到標準方程 y=kx+b,將?A 測定帶入公式中得到 x(mg/mL)。

1. 植物類黃酮含量的計算

圖片2.png

注意事項 

①若?A 測定超出標準線性吸光值范圍:建議適當增加樣本量或將待測樣本適當稀釋后再進行測 定,計算時相應修改;

②為保證結果準確且避免試劑損失,測定前請仔細閱讀說明書(以實際收到說明書內容為準), 確認試劑儲存和準備是否充分,操作步驟是否清楚,且務必取2-3個預期差異較大的樣本進行預測定, 過程中問題請您及時與工作人員聯系。


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