生化試劑盒 - 酸性蛋白酶（ACP）活性檢測試劑盒說明書 Acidic Protease (ACP) Activity Assay Kit 一、酸性蛋白酶（ACP）活性檢測試劑盒產品描述 酸性蛋白酶（ACP）是在酸性環境下作用于蛋白質肽鍵的一類蛋白酶，可將蛋白質水解為氨基酸、
多肽以及游離氨基酸。酸性蛋白酶能在低 pH 條件下能夠有效水解蛋白質，在酒精發酵、食品加工、
釀造、飼料添加、皮革加工等領域具有廣泛應用。
酸性蛋白酶能夠在酸性條件下，催化酪蛋白水解產生酪氨酸，酪氨酸在堿性條件下能夠還原磷鉬
酸化合物生成鎢藍，產物在 680 nm 處具有特征吸收峰，通過吸光值變化即可表征酸性蛋白酶的活性。
二、酸性蛋白酶（ACP）活性檢測試劑盒產品內容圖示 
三、酸性蛋白酶（ACP）活性檢測試劑盒產品使用說明 測定過程中所需要的儀器和試劑：可見分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿
器、可調式移液器、臺式離心機、恒溫水浴/培養箱和蒸餾水。 粗酶液的制備（可根據預實驗結果適當調整樣本量及比例） ①細菌或細胞：離心收集細菌或細胞至離心管內，按照細菌或細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）
為（500-1000）：1 的比例（建議 500 萬個細菌或細胞加入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎（功
率 300 W，超聲 3 s，間隔 7 s，總時間 3 min），4℃ 8000 g 離心 10 min，取上清置于冰上待測。 ②組織：按照組織質量（g）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱取 0.1 g 組織，加
入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 8000 g 離心 10 min，取上清置于冰上待測。
③血清、培養液等液體樣本：直接測定或使用提取液適當稀釋后再進行測定。 測定步驟 ①分光光度計/酶標儀預熱 30 min 以上，調節波長至 680 nm，蒸餾水調零。 ②使用前將試劑一、試劑二和試劑三 30℃預熱 30 min。 ③在離心管中依次加入下列試劑： 
吸光值測定：取 200 μL 反應液于微量玻璃比色皿/96 孔板中，測定 680 nm 處吸光值，記為 A 測
定、A 對照、A 標準和 A 空白；計算?A 測定=A 測定-A 對照，?A 標準=A 標準-A 空白。注：標準管
和空白管只需測定 1-2 次，每個測定管均需設立一個對照管。 .酸性蛋白酶（ACP）活性計算
注釋：C 標準：酪氨酸標準應用液濃度，0.25 μmol/mL；V 樣：反應體系中加入粗酶液的體積，
0.02 mL；V 提：粗酶液總體積，1 mL；V 酶促：酶促反應總體積，0.1 mL；Cpr：粗酶液蛋白濃度，
mg/mL；W：樣品質量，g；T：催化反應時間，10 min。
四、酸性蛋白酶（ACP）活性檢測試劑盒注意事項 ①若?A 測定差值較小，可適當延長第一步反應時間（15-25 min），計算時相應修改； ②為保證結果準確且避免試劑損失，測定前請仔細閱讀說明書（以實際收到說明書內容為準），
確認試劑儲存和準備是否充分，操作步驟是否清楚，且務必取2-3個預期差異較大的樣本進行預測定，
過程中問題請您及時與工作人員聯系。
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