總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒 Total Cholesterol (TC) Content Assay Kit 
一、總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒產(chǎn)品描述 膽固醇（Cholesterol）又稱膽甾醇，是廣泛存在于動物體內(nèi)的一種環(huán)戊烷多氫菲衍生物，可作為
合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素 D 等生理活性物質(zhì)的重要原料，也是構(gòu)成細(xì)胞膜的
主要成分，總膽固醇（TC）是指所有脂蛋白所含膽固醇的總和，包括游離膽固醇和膽固醇酯。
膽固醇酯酶可催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇（FC）和游離脂肪酸（FFA），膽固醇氧化酶可
催化游離膽固醇氧化生成?4-膽甾烯酮和 H2O2，過氧化物酶催化 H2O2 氧化 4-氨基安替比林和酚生成
紅色醌類化合物，產(chǎn)物在 500 nm 處具有特征吸收峰，通過吸光值變化即可定量檢測總膽固醇的含量。
二、總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒產(chǎn)品內(nèi)容
三、總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒產(chǎn)品使用說明 測定過程中所需要的儀器和試劑：可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿
器、可調(diào)式移液器/多道移液器、臺式離心機(jī)、恒溫水浴/培養(yǎng)箱、異丙醇和蒸餾水。 總膽固醇的提取（可根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量及比例） ①細(xì)菌或細(xì)胞：離心收集細(xì)菌或細(xì)胞至離心管內(nèi)，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個）：提取液體積（mL）
為（500-1000）：1 的比例（建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎（功
率 300 W，超聲 2 s，間隔 3 s，總時間 3 min），4℃ 10000 g 離心 10 min，取上清置于冰上待測。 ②組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱取 0.1 g，加入 1
mL 提取液）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 10000 g 離心 10 min，取上清置于冰上待測。 ③血清（漿）、培養(yǎng)液等液體樣本：直接測定或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行檢測。 測定步驟 ①可見分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上，調(diào)節(jié)波長至 500 nm，蒸餾水調(diào)零。 ②TC 工作液的制備（現(xiàn)用現(xiàn)配）：按試劑一：試劑二：試劑三= 1 mL：10 μL：10 μL 的比例配置。 ③在 96 孔板或離心管中依次加入下列試劑：
吸光值測定：測定 500 nm 處吸光值，記為 A 測定、A 標(biāo)準(zhǔn)和 A 空白；計算?A 測定=A 測定-A
空白，?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白。注：空白管只需測定 1-2 次。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立：以 3.0、2.0、1.0、0.5、0.25、0.125 μmol/mL 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液濃度為橫坐標(biāo)（x），
其對應(yīng)的?A 標(biāo)準(zhǔn)為縱坐標(biāo)（y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)方程 y=kx+b，將?A 測定帶入公式中得到
x（μmol/mL）。
3.總膽固醇（TC）含量計算
四、總膽固醇（TC）含量檢測試劑盒注意事項 ①若?A測定超出標(biāo)準(zhǔn)線性吸光值范圍：高于最高值將待測樣本使用提取液適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測
定，低于最低值建議適當(dāng)增加樣本量后再進(jìn)行測定，計算時相應(yīng)修改；
②為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失，測定前請仔細(xì)閱讀說明書（以實際收到說明書內(nèi)容為準(zhǔn)），
確認(rèn)試劑儲存和準(zhǔn)備是否充分，操作步驟是否清楚，且務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測定，
過程中問題請您及時與工作人員聯(lián)系。
產(chǎn)品鏈接：http://www.fang511.cn/products-198.html 文章來源：http://www.fang511.cn/newss-138.html |
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