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人抗淋巴細胞球蛋白(ALG)ELISA Kit試劑盒 |
品牌:CK-E10504
貨號:CK-E10504
規格:48T/96T
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人抗淋巴細胞球蛋白(ALG)ELISA Kit試劑盒 
詳細信息 貨號:CK-E10504 品牌: 原鑫生物 供應商:上海原鑫生物科技有限公司 檢測限: / 檢測方法: 酶聯免疫法雙抗夾心法 應用: ELISA 適應物種: 人/動物/植物 樣本: 血清、血漿、尿液、細胞培養上清、組織液等 規格: 96T/48T 人抗淋巴細胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒操作說明 操作流程: (1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。 (2)酶標板置4℃,包被過夜。 (3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。 (4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 (5)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。 (6)洗板,同(4)。 (7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 (8)酶標板置37℃培養箱的濕盒內,孵育60min。 (9)洗板,同(4)。 (10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。 (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 (12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。 (13)數據處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
人抗淋巴細胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒操作說明 檢測試劑注意事項:
1. 此試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。 2. 使用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘, 3. 濃縮洗滌液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘。 4. 濃縮樣品稀釋液出現結晶后,請于37℃孵育15分鐘 5. 若24小時內進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。 6. 在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。 7. 加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。 8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標示。
人抗淋巴細胞球蛋白(ALG)ELISA試劑盒操作說明 操作步驟:
1. 取出試劑盒,于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應在室溫(20-25℃)內進行。 2. 取出酶標板,按照標準品的次序分別加入50μl的標準品溶液于空白微孔中。 3. 空白微孔中加入50μl的樣品,空白對照加入50μl的蒸餾水; 4. 在樣品孔中加入10μl的生物素;(不含空白對照孔,切忌:生物素只加樣品孔!) 5. 在各孔中加入100μl的酶標記溶液;(不含空白對照孔) 6. 將酶標板用封口膠密封后,37℃孵育反應 1小時;(在孵育箱中保持穩定的溫度與濕度) 7. 充分清洗酶標板3-5次,保持各孔有充足的水壓;(濃縮洗滌液以1:100的比例與蒸餾水稀釋) 8. 酶標板洗滌后用吸水紙徹底拍干; 9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl;(不含空白對照孔) 10. 20-25℃下避光反應15分鐘; 11.各孔加入50μl終止液,終止反應;
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